Immunohistochemical and molecular detection of mannheimia spp. and pasteurella spp. in sheep with pneumonia in Kars province - Turkey

Abstract

In this investigation, presence of Mannheimia haemolytica and Pasteurella multocida in sheep brought to Kafkas University Faculty of Veterinary Medicine between 2011 and 2013 with a suspicion of pneumonia was studied by immunohistochemical and bacteriological methods. Study materials were 100 sheep lungs. After routine histopathological investigations lungs were immunohistochemically stained with antibodies prepared against both of the agents. In bacteriological investigations, tissue samples were inoculated into 7% sheep blood agar and Mc Conkey agar and incubated for 24-48 h in aerobic conditions, and the suspected colonies were evaluated for Mannheimia and Pasteurella species. In histological investigations, pneumonias were classified as 28% fibrinous bronchopneumonia, 21% prulent bronchopneumonia, 20% acute-catharal bronchopneumonia, 18% interstitial pneumonia, 11% verminous pneumonia and 2% adenomatous pneumonia. In bacteriological investigations Mannheimia haemolytica and Pasteurella multocida was detected in 19 and 3 cases, respectively, these numbers were 17 and 2, respectively in immunohistochemical investigations. The results of PCR analysis for both Mannheimia haemolytica and Pasteurella multocida paralleled with the findings of microbiological culture. The results of the study showed that Mannheimia haemolytica is an important cause of pneumonia in sheep in Kars, and Pasteurella multocida, although with lesser importance can cause pneumonia in this species.

Bu çalışmada Kafkas Üniversitesi Veteriner Fakültesine 2011-2013 yılları arasında pnömoni şüphesi ile getirilen koyunların akciğerlerinde Mannheimia haemolytica ve Pasteurella multocida etkenlerinin varlığı immunohistokimyasal ve bakteriyolojik yöntemlerle araştırılmıştır. Çalışma materyalini pnömoni şüpheli 100 adet koyun akciğeri oluşturdu. Akciğer doku örnekleri rutin histopatolojik incelemelerin ardından her iki etkene karşı hazırlanan antikorlar kullanılarak immunohistokimyasal olarak boyandı. Bakteriyolojik incelemeler için alınan örneklerin %7 koyun kanlı agar ve Mc Conkey agara ekimleri yapıldı. Aerobik koşullarda 24-48 saat inkübasyonu takiben şüpheli koloniler Pasteurella ve Mannheimia türleri açısından incelendi. Histopatolojik incelemeler sonucunda pnömonilerin %28’i fibrinli bronkopnömoni, %21’i prulent bronkopnömoni, %20’si akut-kataral bronkopnömoni, %18’i intersitisyel pnömoni, %11’i verminöz pnömoni ve %2’si adenomatöz pnömoni olarak sınıflandırıldı. Bakteriyolojik incelemeler sonucunda 19 koyunda Mannheimia haemolytica ile 3 vakada Pasteurella multocida tespit edilirken bu oranlar immunohistokimyasal incelemelerde sırasıyla 17 ve 2 olarak belirlendi. PZR analizleri hem Mannheimia haemolytica hem de Pasteurella multocida için mikrobiyolojik analizler ile paralellik gösterirdi. Çalışmanın sonucunda Kars ilindeki koyun pnömoni vakalarında Mannheimia haemolytica’nın önemli derece yer aldığı buna karşın Pasteurella multocida’nın da az sayıda olmakla beraber pnömoni etkeni olarak görev yaptığı belirlendi.